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薄層色譜TLC的定性檢測(cè)方法

更新時(shí)間:2019-07-27      點(diǎn)擊次數(shù):4510
薄層色譜TLC是以涂布于支持板上的支持物作為固定相,以合適的溶劑為流動(dòng)相,對(duì)混合樣品進(jìn)行定性與定量分析、分離和鑒定的一種層析分離技術(shù)。
 
薄層色譜TLC的定性檢測(cè):
展開完畢后,把薄層從層析缸中取出,用鉛筆劃出或小針刺出展開劑前緣的位置,隨即進(jìn)行顯色,以確定各個(gè)斑點(diǎn)的位置、Rf值和顯色的情況,從而判斷試樣中含有哪些組分。有色物質(zhì)經(jīng)展開后呈現(xiàn)明顯的色斑,很易判斷。對(duì)于無色物質(zhì),可根據(jù)化合物的性質(zhì),用物理檢出法、化學(xué)檢出法、酶與生物檢出法和放射性檢出法進(jìn)行顯色。
1)物理檢出法:紫外光、碘、水
 
2)化學(xué)檢出法:化學(xué)檢出法是在薄層上使用一種或數(shù)種化學(xué)試劑與被檢出物質(zhì)反應(yīng),生成有顏色的化合物而定位。這種試劑叫顯色劑。
顯色劑一般分為兩類,即通用顯色劑和專屬性顯色劑
(1)通用顯色劑:
a.濃硫酸或50%的硫酸溶液:極大多數(shù)有機(jī)物質(zhì),噴此種顯色劑后立刻或在加熱到110—120℃并經(jīng)數(shù)分鐘后出現(xiàn)棕色到黑色斑點(diǎn)。
b.酸堿指示劑溶液:例如0.3%溴甲酚綠甲醇溶液,在綠色背景上顯現(xiàn)黃色斑,表示是脂肪族羧酸。常用的通用顯色劑還有:5%磷鉬酸乙醇、堿性高錳酸鉀溶液、硝酸銀-氫氧化銨試劑、熒光顯色劑等。
(2)專屬性顯色劑,指能使某一類或少數(shù)幾類官能團(tuán)或化合物顯色的試劑。
 
3)原位化學(xué)衍生化
 
4)生物與酶檢出法
 
5)放射顯影法
 
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